<<
>>

Хроматографический анализ

Мы провели хроматографический анализ матричной настойки в тонких слоях сорбента, восходящей и нисходящей одномерной, а также двумерной

хроматографией на бумаге [219].

При предварительном исследовании обнаружили, что настойка из по­бегов багульника, собранных в Республике Коми, отличалась более богатым фенольным комплексом при хроматографировании, поэтому именно ее ис­пользовали для более подробного изучения.

Двумерное хроматографирование матричной настойки осуществляли на квадратном листе бумаги Filtrak FN-4 размером 26x26 см. Настойку нано­сили капилляром (50 касаний) на диагональ квадрата вблизи одного из его углов. Первое направление проводили в системе н-бутанол-уксусная кислота- вода (4:1:2), второе — в системе 15% уксусная кислота. После хроматографи­рования в первом направлении на протяжении 12 часов хроматограмму вы­сушивали и затем подвергали хроматографированию во втором направлении в течение 4 часов. Двумерную хроматограмму высушивали и рассматривали в УФ-свете, отмечая положение и цвет пятен до и после обработки хромато­граммы парами аммиака и затем определяли подвижность веществ, вычисляя величины Rf (табл. 4.3). При этом обнаружено 16 веществ, 6 из которых по окраске в УФ свете до и после обработки аммиаком и значению Rf предвари­тельно отнесены нами к флавоноидам, 3 - к гидроксикоричным кислотам, 3 - к кумаринам.

Для идентификации веществ, обнаруженных на двумерных хромато­граммах, также проводили одномерное хроматографирование с использова­нием веществ-свидетелей.

Настойку наносили капилляром на линию старта хроматографической бумаги Filtrak FN-4 (30-40 касаний капилляром). Рядом на расстоянии 2,5 см на линию старта наносили вещества-свидетели: гиперозид и арбутин (по 10 касаний капилляром), которые предварительно растворяли в 70% этаноле. Вещества наносили таким образом, чтобы диаметр пятна не превышал 7 мм.

Хроматографическое разделение осуществляли восходящим способом в 15% уксусной кислоте. Готовую хроматограмму вынимали, сушили и рас­сматривали в УФ-свете, отмечая положение и цвет пятен до и после обработ-

Таблица 4.3

Результаты двумерной хроматографии на бумаге фенольных соединений матричной настойки

пятна

Значение Rf

в системах растворителей

Окраска пятна в УФ-свете
I II
До проявления парами аммиака После проявления парами аммиака
1 0,912 0,082 - желтая
2 0,591 0,129 фиолетовая голубая
3 0,800 0,325 светло-коричневая желтая
4 0,669 0,389 светло-коричневая желтая
5 0,809 0,495 коричневая . желто-коричневая
б 0,828 0,563 серая желтоватая
7 0,847 0,611 светло-голубая
8 0,902 0,639 - голубая
9 0,939 0,632 - фиолетово-серая
10 0,688 0,711 - '• желто-зеленая
11 0,707 0,804 .
-
желто-зеленая
12 0,581 0,738 голубая усиление окраски
13 0,567 0,782 зеленовато-голубая усиление окраски
14 0,484 0,829 фиолетовая фиолетовая
15 0,693 0,033 желтая. усиление окраски
16 0,367 0,552 светло-коричневая усиление окраски

Системы растворителей:

1-е направление - н-бутанол-уксусная кислота-вода 4:1:2, П-е направление — 15% уксусная кислота.

ки хроматограммы парами аммиака. Затем определяли подвижности веществ, вычисляя величины Rf. В результате обнаружили два пятна, флюоресцирую­щих коричневым цветом: пятно 1, более яркое - вещество-свидетель (гиперо­зид Rf 0,51), пятно 2, менее яркое, Rf 0,51 - матричная настойка. Затем хрома­тограмму обрабатывали 10% спиртовым раствором щелочи и затем реакти­вом Паули по Кутачеку [217]: стрептоцида белого 3 г, н-бутанола 14 мл, хло­ристоводородной кислоты концентрированной 6 мл, воды очищенной до 200 мл; перед использованием добавляли натрия нитрит кристаллический. После высушивания на хроматограмме детектировали 2 пятна розового цвета: пятно 1, более яркое, - вещество-свидетель (арбутин Rf 0,885), пятно 2, более свет­лое, Rf 0,893 - матричная настойка. Таким образом, нами подтверждено нали­чие гиперозида и арбутина в матричной настойке (табл. 4.4).

Для обнаружения кумаринов хроматографическое разделение осуществ-

- Ill -

Таблица 4.4

Результаты одномерной восходящей хроматографии фенольных соеди­нений матричной настойки с использованием веществ-свидетелей

№ пятна Значение Rf Окраска в УФ-свете
До проявления парами аммиака После проявления па­рами аммиака
1 0,05 желтая усиление окраски
2 0,51 - желтая
3 0,63 коричневая желто-коричневая
4 0,89 - розовая
Арбутин 0,89 - розовая
Гиперозид 0,51 коричневая желтая

ляли нисходящим способом после импрегнирования бумаги смесью форма­мида с 96% спиртом этиловым (1:4) в системе бензол-этилацетат-уксусная кислота в соотношении 50:50:1.

В качестве веществ-свидетелей использовали эскулин, эскулетин, скополетин, умбеллиферон. Готовую хроматограмму вы­сушивали и рассматривали в УФ-свете, отмечая положение и цвет пятен до и после обработки хроматограммы парами аммиака. Затем определяли под­вижность веществ, вычисляя величины Rf (табл. 4.5).

Таблица 4.5

Результаты одномерной нисходящей хроматографии матричной настойки с использованием веществ-свидетелей

№ пятна Значение Rf Окраска в УФ-свете
До проявления парами аммиака После проявления па­рами аммиака
1 0,30 красно-коричневая желтая
2 0,48 голубая голубая
Эскулин 0,15 голубая голубая
Эскулетин 0,34 зеленовато-голубая желто-зеленая
Скополетин 0,49 голубая голубая
Умбеллиферон 0,51 голубая. сине-голубая

Следовательно, подтвердили наличие скополетина в матричной настойке.

Для обнаружения веществ фенольной природы и изучения возможно­сти экспресс-анализа матричной настойки нами проведена тонкослойная хроматография [220,230].

Настойка наносилась нами на стартовую линию хроматографической пластинки «Силуфол» (15>

<< | >>
Источник: КОРОТАЕВА МАРИНА СЕРГЕЕВНА. ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЧЕТЫРЕХ ВИДОВ РОДА LEDUM L. Диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук. Ярославль - 2006. 2006

Скачать оригинал источника

Еще по теме Хроматографический анализ:

  1. — многофакторные методы
  2. Лекция №8 ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
  3. ОБЩАЯ МЕТОДИЧЕСКАЯ СХЕМА ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
  4. КОЛОНОЧНАЯ ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ
  5. ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ НИЗКОГО ДАВЛЕНИЯ
  6. КОЛОНОЧНАЯ ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ ОСНОВНЫЕ ПРИНЦИПЫ
  7. Криміналістична одорологія. Техніко-криміналістичні засоби і прийоми роботи зі слідами запаху на місці події.
  8. 44. Криминалистическое исследование веществ и материалов
  9. Предмет, система и методы судебной экспертологии.
  10. 35. Методика археологических исследований
  11. Качественное обнаружение
  12. Углеводы
- Акушерство и гинекология - Валеология - Ветеринария - Внутренние болезни - Гастроэнтерология и гепатология - Гематология - Геронтология и гериатрия - Гигиена и санэпидконтроль - Диетология - Здравоохранение - Иммунология и аллергология - Интенсивная терапия - Инфекционные заболевания - История медицины - Кардиология - Клинические методы диагностики - Кожные и венерические болезни - Медицина катастроф - Медицинская паразитология - Медицинская этика - Медицинские приборы и аппараты - Медицинское материаловедение - Наследственные болезни - Неврология и нейрохирургия - Невропатология - Онкология - Организация системы здравоохранения - Основы медицины - Оториноларингология - Офтальмология - Паллиативная медицина - Патологическая анатомия - Патологическая физиология - Педиатрия - Профессиональные болезни - Психиатрия и наркология - Пульмонология - Ревматология - Социальная медицина - Стоматология - Судебная медицина - Токсикология - Травматология и ортопедия - Урология - Фармакология - Фармацевтика - Физиология человека - Фтизиатрия - Хирургия - Эндокринология - Эпидемиология -